霍乱弧菌,这玩意儿说白了就是引发霍乱的罪魁祸首。它在培养的时候对环境要求还挺挑剔的,得用专门的培养基来“伺候”......常见的培养基有几种,像碱性蛋白胨水 TCBS琼脂这些都比较常见!
先说碱性蛋白胨水吧,这个算是增菌用的。霍乱弧菌喜欢碱性环境,这种培养基pH值调得比较高,大概在8.4左右.蛋白胨提供营养,让细菌在里面快速繁殖.虽然这东西不是选择性特别强的培养基,但能遏制一部分其他杂菌生长,给霍乱弧菌一个相对干净的生长空间。
接下来是TCBS琼脂,全名叫硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂.名字听着有点绕口,但它是个选择性很强的培养基.里面加了不少胆盐,用来遏制革兰氏阳性菌。蔗糖这成分是关键,因为霍乱弧菌不发酵蔗糖,而一些其他肠道致病菌比如副溶血性弧菌可能会发酵,这样就能通过颜色变化区分开来。长出来的菌落通常是绿色的,挺容易辨认的。
还有个叫庆大霉素琼脂的培养基,这名字一听就知道含有抗生素——庆大霉素.这东西对很多革兰氏阳性菌和部分阴性菌都有遏制作用.霍乱弧菌对庆大霉素不太敏感,能在上面长出来。这个培养基在国内部分地区使用比较多,尤其是一些基层实验室,操作起来也比较方便。
有时候还会用到一种叫TTGA的培养基,也就是三号培养基。它里面含有牛胆汁 亚碲酸钾这些成分.亚碲酸钾能让霍乱弧菌形成黑色菌落,和其他细菌区分明显。不过这个培养基配制起来麻烦一点,试剂不容易搞齐,有些地方可能不太常用。
不同地区用的培养基可能不一样,主要看当地流行情况 实验室条件和检测目的。比如在疫情暴发初期,可能优先用碱性蛋白胨水做增菌,然后再转种到选择性更强的培养基上。如果是做进一步鉴定,可能需要更特异的选择培养基.
配制这些培养基时要注意灭菌温度和时间.一般用高压蒸汽灭菌,121℃维持15分钟左右.灭菌后冷却到50℃左右再倒平板,不然琼脂会凝固太快,影响后续操作!有些成分比如糖类不能高温灭菌,得用过滤除菌的方法加入.
储存方面,干粉状态的培养基要放在阴凉干燥处,避免受潮。配好的培养基如果暂时不用,可以放冰箱冷藏,但时间别太长,一般一周以内用完。要是发现培养基变色或者长霉了,那肯定就不能用了。
实际应用中也会遇到一些问题。比如有些非霍乱弧菌也可能在TCBS上长出绿色菌落,这时候就得靠生化试验或者分子检测来确认。或者某些变异株在选择性培养基上长得不好,容易漏检.
另外呢,霍乱弧菌对温度 湿度 光照这些环境因素也挺敏感的。培养皿一般放在37℃恒温箱里孵育18~24小时。时间短了可能看不到明显菌落,时间长了又容易被杂菌污染!
现在也有不少商业化的培养基产品,省去了自己配制的麻烦......不过价格贵点,小单位可能负担不起......自制的话虽然便宜,但质量控制难度大,批次之间可能出现差异.
,霍乱弧菌的培养离不开合适的培养基。选哪种培养基得根据具体情况来定。没有哪个培养基是全能的,各有各的优点和局限.配合好检测流程 做好质控,才能提高检出率。
当然,光靠培养还不够,还得结合临床表现 流行病学资料一起判断。毕竟霍乱这病来得急,传播快,耽误不得.培养只是诊断的一个环节,后面的药敏试验 分子分型什么的也很重要。
写到这里,感觉这话题还是挺复杂的.不同的实验室可能有不同的做法,经验多了自然就知道怎么处理各种情况!掌握基本原理,灵活应对才是关键。
,希望你学到的“霍乱弧菌培养基”能对你有帮助.祝你身体健康,不头痛,不腰酸。每天动一动,身体才棒。小提示:生活简单点,身体会更舒服。
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