以往的实验室检查有梅毒螺旋体查看,梅毒血清实验和脑脊液检查。随着基因确诊技术的发展,pcr技术应用检测梅毒螺旋体dna,使梅毒的确诊变得准确、快速、灵敏。
一、梅毒螺旋体检查
(一) 检查办法
1.暗视野显微镜检查:在皮损处,用玻片刮取组织渗出液或淋巴结穿刺液,见有活动的梅毒螺旋体。
2.免疫荧光染色:在荧光显微镜下可见绿色的梅毒螺旋体。
3.活体组织查看梅毒螺旋体,如用银染色法(warthin-starry)法或(levoaditis法)或荧光抗体染色,可查见梅毒螺旋体,呈黑褐色,有螺旋构造,位于真皮毛细血管周围。银染色的阳性成果需谨慎解说,由于类似梅毒螺旋体的其他物质易混淆。而特异性荧光查看则更为牢靠。
(二) 螺旋体的鉴别
镜下查看梅毒螺旋体与雅司、地方性梅毒、品他三种非性病性螺旋体鉴别,此外还应与齿大螺旋体、齿小螺旋体、软螺旋体、生殖器螺旋体相鉴别。
1.雅司、地方性梅毒、品他三种非性病螺旋体:形态上不能与梅毒螺旋体相差异,但流行病学、病史、临床表现可以鉴别;
2.齿大螺旋体:为疏螺旋体,比梅毒螺旋体长,存在于口腔中,尤其在齿缝内最多;
3.齿小螺旋体:比梅毒螺旋体短,旋距也短,运动不规则,两端较中部略宽。首要见于齿垢中;
4.软螺旋体:为疏螺旋体,螺旋较少,运动不规律且快,常不断改变其形态。寄生于皮肤溃疡中。
5.生殖器螺旋体:比梅毒螺旋体矮小,螺旋体大而不规则,生于阴垢内,不经常清洗者检出率较高。
6.其他:与螺旋形网状纤维、纤维蛋白细丝、纤毛、串状红细胞等呈螺旋状的物体相鉴别。
二、梅毒血清实验
根据所用抗原不同,梅毒血清实验分为以下两大类:
(一) 非梅毒螺旋体抗原血清实验,用心磷脂作抗原,测定血清中抗心磷脂抗体,亦称反应素。本实验灵敏性高而特异性较低,且易发生生物学假阳性。早期梅毒患者经充分治疗后,反应素可以消失,早期未经治疗者到晚期,部分病人中反应素也可以减少或消失。目前一般作为筛选和定量实验,调查疗效,复发及再感染。
1.性病研讨实验室实验(venereal disease research laboratory test,vdrl);用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原,可作定量及定性实验,试剂及对照血清已标准化,费用低。此法常用,操作简单,需用显微镜读取成果,缺点是一期梅毒灵敏性不高。
2.快速血浆反应素实验(rapid plasma reagin test, rpr):是vdrl抗原的改良,灵敏性及特异性与vdrl相似,优点是肉眼即可读出成果。
3.不加热血清反应素玻片实验(unheated serum reagin usr)也是vdrl抗原的改良,灵敏性及特异性与vdrl相似。
(二) 梅毒螺旋体抗原血清实验:用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。这种实验灵敏性和特异性均高,一般用作证实实验。这种实验是检测血清中抗梅毒螺旋体igg抗体,即使患者经过足够治疗,仍能长期存在,乃至终身不消失,血清反应仍持续存在阳性,因此,不能用于调查疗效。
1.荧光梅毒螺旋抗体吸收实验(fta-abs test):此法是较灵敏和较特异的螺旋体实验。
2.梅毒螺旋体血凝实验(tpha):灵敏性和特异性均高,操作简洁,但对一期梅毒不如fta-abs实验灵敏。
3.梅毒螺旋体制动实验(treponema pallidum immobilization ,tpi);用nichol株螺旋体(活的)加病人血清(含抗体)后,在补体的参与下可遏制螺旋体的活动。如≥50%梅毒螺旋体中止活动,则为阳性。此实验特异性、灵敏性均高,但设备要求高,操作难,仅供研讨用。
三、基因确诊技术检测梅毒螺旋体
梅毒螺旋体不能进行体外培养。检测临床标本中梅毒螺旋体最灵敏、牢靠的办法是兔感染实验(rit),rit能证实活的梅毒螺旋体存在,是检测梅毒螺旋体常用的标准办法。然而用rit对新生儿或成人梅毒进行常规确诊不切合实际。梅毒的血清学确诊对确定感染及治疗很有意义,但对早期梅毒确诊不灵敏,对先天性及神经性梅毒的确诊不够特异。血清学实验用作先天性梅毒的辅助确诊,其首要问题是将无症状感染婴儿从非感染婴儿差异开来,这些婴儿的妈妈梅毒血清实验阳性,困难在于不能将妈妈体液免疫反应同婴儿的抗体反应相差异,由于妈妈的igg可传递给胎儿。另外由于igg终身存在,所以很难评价治疗成果。血清学确诊常常又存在着假阳性。
【本文由重庆二建医院供稿】
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