一、支原体感染的诊断标准
根据实验室检查结果即可做出诊断。
(一)培养与生化反应
支原体兼性厌氧,在5s%~10%CO2、80%~90%湿度的条件下,生长较好,支原体细胞中的主要成分胆固醇及蛋白质均来自培养基,后者需含血清、卵黄等。菌落形似煎荷包蛋,一般为大菌落,100~300nm,生长需7~14d,另一种,菌落10~25nm,生长快,只需24~48h,称为T株,即脲解支原体。常见支原体的生化反应见表1。
(二)抗体及抗原检测
肺炎支原体感染后2周,约50%产生抗体,红细胞冷凝集试验阳性,效价1∶32以上,恢复期效价4倍增长则意义大。40%~50%病例链球菌MG凝集试验阳性。另可通过补体结合试验、间接血凝、酶联吸附等检测。此外,病灶灌洗液通过PCR检测。此外,利用基因探针快速检测系统,应用同位素标记DNA,可测 定肺炎支原体中的RNA,与培养相比,符合率达89%。
二、支原体感染的检查
1.血常规
周围血白细胞计数一般正常,嗜酸性粒细胞增多。
2.X线检查
衣原体肺炎胸片无特异性,多为单侧下叶浸润,表现为节段性肺炎,严重者呈广泛双侧肺炎。沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润,过度充气征比较常见,偶见大叶实变。
3.直接涂片镜检
取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位标本做涂片,进行GZmesa染色,原体染成红色,始体染成深蓝色。沙眼衣原体包涵体因含有糖原。801染色染成褐色。
4.快速抗原检测
多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体,还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体、酶标抗体18G及底物进行比色定量检测。这两种方法简便敏感。
5.衣原体分离
肺炎衣原体培养较好用Hela细胞或Hep-2细胞,一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本,及时接种。衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep-2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA),该技术敏感性高,特异性强,如能早期采集标本,可在48小时内获得阳性结果。
6.血清学检查
采用补体结合试验,在恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高4倍或4倍以上,即有诊断意义,但无早期诊断意义。微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体。
7.PCR技术
普通PCR技术检测肺炎衣原体特异性DNA,具有快速、简便、特异的优点,敏感性高于细胞分离技术,用套式PCR(nPCR)检测可显著提高其敏感性。
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