霍乱碱性蛋白胨培养后

霍乱弧菌，碱性蛋白胨水。实验室里头最常见的初筛手段之一。瓶子排成一列，透明液体，微微晃动。有时候早上放进去的样本，到下午就变了样。浑浊起来，像米汤，又不像那么均匀。有人盯着看，说像煮开的豆浆，浮着一层皮.其实不是皮，是菌体在繁殖。

培养温度三十七度。恒温箱嗡嗡响，老式的那种，铁架子生锈了，门关不严实。得拿个夹子夹住。夏天特别容易坏，压缩机过热，断电几次。有回连续三天停电，样本全废了。没办法，只能重采。粪便标本，稀水样,带黏液。病人刚拉出来的好，来不及送检就放冰箱。但冰箱也不是保险柜，时间长了照样失效。

碱性蛋白胨水的好处是选择性强。pH八点五上面，别的细菌活不了。大肠杆菌受不住，沙门氏也蔫了。可霍乱弧菌不怕碱,反倒活得欢。十小时就能翻几十倍。镜下看，逗点状，运动活泼，像小蝌蚪扭来扭去。做动力试验的时候，暗视野下一片乱窜，跟炸了锅似的。

但这东西不稳定。培养久了，死的死，裂的裂。超过十八小时，阳性率反而下降!不能拖。定时观察。有人图省事，晚上接了标本不处理,第2天才孵。结果阴性，可临床症状明摆着：剧烈腹泻 脱水 腓肠肌痉挛。医生急得跳脚，检验科只好重新采样......

还有一次，一个村子集体发病.二十多人，都吃了一家早餐摊的米粉。摊主用井水泡豆芽，井挨着化粪池.疾控的人来了，采了水样 食物残渣 肛拭子。我们连夜做培养。那批样本里，一半在碱性蛋白胨水里长起来了。浑浊度不一样，有的轻，有的重。挑出来再划血平板，典型菌落——灰白 光滑、边缘整齐。氧化酶阳性,涂片革兰阴性杆菌.基本能定。

可问题来了。有个孩子的样本，第1次阴性.家长吵，说别人都阳，我家孩子症状更重，怎么就阴？重做。这次换新试剂，提前预热培养基。四小时后就开始浑。十小时明显浑浊.挑出来，PCR也做了,O1群。原来是前次操作时培养基保存太久,碱性下降，pH跌到七点九。差那零点六，就够呛。

试剂这事，真不能马虎。蛋白胨浓度要准，氯化钠比例也不能错。自己配的话，称量得小心。有回实习生图快，直接舀一大勺倒进去，没搅匀。结果一批样本全受影响。对照组还好，可疑样本全部假阴性。主任发了火，说这不是实验，是命!

运输过程也有讲究。标本得密封，防漏。曾经有个袋子破了，渗出来，污染了转运箱。消毒费老大劲。后来改用双层袋，加冰块。但冰块也不能直接接触试管，否则冻住了，细胞破裂。细节一堆，哪个环节出岔都不行。

再说说判断标准。浑浊就是阳性？不一定。有时候真菌污染，也会让液体变混。或者标本本身有大量黏液。这时候得结合其他检查。比如增菌后的涂片，或者直接上免疫胶体金。但胶体金贵，基层用不起。还是靠培养。

有地方土办法多。拿开水烫瓶子,以为能灭菌。结果瓶子炸了。或者用酒精棉球塞瓶口，以为无菌，其实挥发完了还沾着杂菌。这些细节，书上不写，只有干过才知道。

还碰到过耐碱性差的变异株。文献提过，少见。那次培养始终不浑，但血平板上有可疑菌落。回头查原始标本，PCR阳性。说明碱性蛋白胨水漏检了。后来改用添加亚硒酸盐的改良配方,才勉强养出来。这类情况不多，但一旦遇上，容易误判。

经验这东西，慢慢攒。老检验员一看瓶子，就知道有没有戏。年轻人大眼瞪小眼，非得等满十八小时才敢报。其实八到十小时就有苗头。轻微摇动，底部沉淀扬起来，很快重新沉降——这是典型生长迹象。但没人教,光看书，哪知道这些？

报告也得讲究。不能只写“阳性”或“阴性”......得备注培养时间 浑浊程度、是否复核。不然临床大夫看不懂。有次急诊科打电话来问：“你们报阴性，病人已经在输抗生素了，到底是不是霍乱？”我们翻记录，发现培养十二小时时其实微浑，值班的没注意,直接判阴......赶紧补做，确认阳性。好在纠正得早,没出大事。

水源污染的样本更难搞。水里的菌量少，直接培养常阴性。得浓缩，离心，取沉淀再接种。步骤多了,误差机会也多.有一回收集河水，分五份，同样处理，结果三阳两阴.重复性差。后来怀疑离心机转速不稳，换了台设备才好些。

最后还得提一句：培养只是第1步。确诊得结合流行病学史 临床表现 其他检测。单靠一瓶碱性蛋白胨水，谁也不敢拍胸脯。但它便宜 简单 能用，尤其在资源有限的地方,还是扛把子。

有时候想想，就这么个玻璃瓶，装点黄汤水,居然能揪出致病元凶.不算高科技，可关键时刻，它比什么都实在。

，希望大家多了解“霍乱碱性蛋白胨培养后”的知识.在生活中多留心，主动预防疾病。愿你每天气色好，走路轻快，心情愉快。早睡早起，坚持锻炼,健康其实不难。小提示：心情好，气色就好，身体也更棒。