储存牙髓干细胞|牙髓干细胞的保存方式

储存牙髓干细胞|牙髓干细胞的保存方式联系 。目前，可供选择的冷冻方案有几种，取决于干细胞库的软硬件情况。

1、速率不受控冷冻

一种简单、廉价的替代方案，不需要经过培训或掌握特定技术。首先将冷冻保护剂与样品预冷至4℃，然后直接置于-80℃的冰箱或液氮中。目前的研究发现，速率不受控冷冻仍然是长期低温保存牙髓干细胞的常用廉价方案，对细胞活力、多能性、增殖和分化影响较小。

2、控制速率冷冻

为了使干细胞损伤小化，可引入控制冷冻速率的方法。慢速冷冻速率(SRF)每分钟降温1-2℃，通常是低温保存期间维持干细胞活力的较好选择。而费用更昂贵的超慢速冷冻速率(USFR)，每分钟降温 0.3至0.6℃。与快速冷冻方法相比，上述方法在解冻后表现出更高的细胞生长和活力。

3、玻璃化快速冷冻

玻璃化快速冷冻法的原理是在高浓度冷冻保护剂中形成玻璃化样固体，从而对细胞起到保护作用。这种方法已经在人类胚胎干细胞、**和精子的低温保存中得到很好应用。例如Jadoon等人2015年的研究发现，相比慢速冷冻，快速冷冻法能够得到更多存活的玻璃化**(70.3% vs 12.5%)。

4、磁性冷冻

磁性冷冻保存是一种特殊的受控慢速冷冻技术。研究证明磁场在冷冻期间降低水的聚集，有利减少冰晶的形成以及弱电流的产生，细胞在冷冻期间得到更好保护。

到目前为止，研究证实该技术可以有效地冷冻保存完整的牙齿以及分离的牙髓干细胞。Lee SY等观察了不同浓度DMSO下的磁性冷冻保存对大鼠完整牙齿和牙髓组织的影响。他们认为，相对其他方式，磁性冷冻是保存完整牙齿和牙髓组织的有效方法。解冻后，采用该方法保存的牙齿及牙髓组织可回收具有更高生物活性的牙髓干细胞。

完整的冷冻保存方案的建立和优化，除了上述 冷冻方法的选择，还应包括牙齿的采集和运输、干细胞的分离和扩增、冷冻保护剂的种类和浓度、细胞解冻方案的优化、解冻温度的确定等。