储存免疫细胞一次需要冻存多少管?

　　储存免疫细胞一次需要冻存多少管?免疫细胞储存技术目前已相对成熟，通过密度梯度离心直接从血液中分离提纯就能得到免疫细胞，然后用冻存液将细胞混匀保存在冻存管中。免疫细胞从分离提纯到冻存的技术流程相对成熟稳定，但是在储存管数上没有统一的标准。我们通过长期的实践，总结经验，探索规律，我们认为免疫细胞储存采用“9管冻存制”是比较适宜的。

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　　1、分配合理

　　外周血免疫细胞储存单次采集血液一般在150～200ml，经过分离提纯后的组分主要为淋巴细胞，少量单核细胞和粒细胞等，平均回收率在80%左右，正常人体中淋巴细胞一般为1×10^6～2×10^6个/ml，所以最终能分离出的免疫细胞大约为1.5×10^8～3×10^8个，即每管冻存规格为1.6×10^7～3.3×10^7个细胞。

　　目前免疫细胞技术应用主要包括CIK、NK、NKT、CTL、CAR-T、CAR-NK等等，单次应用所需细胞数量为3千万左右，即应用管数为1～2管，9管完全能够满足一个疗程3～4次的细胞培养应用。

　　2、便于管理

　　装有细胞的冻存管不能直接放进液氮，中间需要间隔和支持的装置——冻存盒。冻存盒常规型号为9×9的方盒，一份样本9管细胞对应一列，这也方便了日后的管理和使用。

　　3、减少浪费、降低风险

　　单支冻存管的容量是固定的，冻存管数过少可能会出现单管细胞数量应用时过多导致细胞浪费，而且冻存密度过大的细胞复苏后的状态较差，细胞的应用次数也会减少。冻存管数过多又使得单管细胞数量应用不够，从而需要多支复苏，过多的冻存液会导致回收率降低，也会导致细胞浪费。同时，过多的冻存管意味着过多的接触，在复苏操作时容易增加污染的风险。所以每次复苏应用比较好是1～2管，并且能充分利用细胞。

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