精囊囊肿的诊断首先依据临床症状和直肠指诊，精囊较大的囊肿常被误诊为尿潴留或充盈的膀胱，但插入导尿管却收集不到尿液，直肠指诊，腹部双合诊在前列腺上方可扪及肿块。
精囊囊肿还需与精囊癌相鉴别，精囊癌极少见，大多数继发于前列腺，膀胱，直肠或附近的组织，加藤哲郎等认为囊肿可能合并恶性肿瘤，应加以仔细鉴别，直肠指诊时可扪及坚硬结节，不规则的梭形肿块，膀胱镜检查可见整个膀胱底部及三角区抬高，而致膀胱颈梗阻，并有原发病症状，精囊造影可明确肿瘤与精囊的关系。
本病还需与前列腺囊肿，包虫性囊肿，膀胱憩室和精囊炎相鉴别，后者经直肠指诊，CT，B超常能区分，精囊造影和膀胱镜检可资鉴别。
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