意大利研究人员称,腺病毒介导基因转染供体器官或许最终能够少用或停用外源性免疫遏制剂。
Mario Negri药物研究所的A. Benigni及其同事认为,“肾移植中,通过基因转变来对免疫反应进行局部调节可能是一种减少免疫遏制剂毒性的方法,该想法别具一格,可以此方法预防移植后急性排斥反应。曾经有研究显示,在肾动脉中注入PEI25k可以进行基因转染,但是基因的转染率较低。现在我们比较肾移植术前后,在肾脏的基因转染中使用非滤过病毒和滤过病毒的风险和效益之比。”
实验第一步,研究人员从Lewis鼠中获得含有PEI 25k的人造自由细胞介质复合物的供体肾脏,它对β-半乳糖苷酶基因进行表达编码。这些取自大鼠的供体肾在植入同源基因动物体内后功能正常。
第二步研究人员在肾移植前,向供体肾中注入复制功能缺陷的腺病毒来编码β-半乳糖苷酶(AdCMV. β-gal)。
实验数据显示,含有PEI 25k/DNA复合物的肾脏导致大范围的灌注不足。灌注不足是由肾小管和肾小球受损、毛细血管血栓以及肾小球毛细血管内C3补体聚集引起的。虽然肾脏再次灌注时降低了PEI 25k/DNA的量,Benigni等人仍旧不能检测到基因转染量。
然而,在注入了腺病毒的动物中研究人员观察到β-半乳糖苷酶活性随着时间逐渐增加。表达主要局限于近端和远端肾小管细胞中。这在组织化学和原位杂交中得到证实。
Benigni等人总结到,“β-半乳糖苷酶表达能力的提高是由移植前利用AdCMV.β-gal对肾脏进行灌注,它主要表达在远端和近端肾小管细胞上。不象使用非滤过病毒进行基因转染,以腺病毒为载体对供体肾进行的基因转染技术可在器官移植领域提供令人振奋的研发分子治疗药物的思路。”
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