干细胞原液存储
作者: 诺赛基因--中欧莱康科普专栏 时间:2021-10-27 10:27:07
在临床工作条件下,采用骨髓遏制细胞研究方法以及冷冻保存外周血干细胞原液(PCC)。血外周干细胞移植和骨髓的主要存在区别就是在于提高细胞生长因子动员后获得的干细胞原液浓度水平较高,分化问题较多的细胞含量不断增加,脂肪组织缺乏。 分馏阶段我们通常局限于通过离心来减少精矿的体积。二甲基亚砜(DMSO)溶液被用作低温保护剂,通常需要添加羟乙基淀粉(HEC)并随后进行分析程序或非软件冻结。
低温保护剂的冷冻保护机制与它们与水分子的连接能力有关,这使得它们参与晶体生长的速度更慢,从而阻止了介质渗透性的快速增加,减少了细胞的渗透负荷。在程序冻结的情况下,冷却速率较好为1-3 ° c/min,直到结晶阶段结束。造血干细胞溶液可以在零下85摄氏度的低温冷却器中储存长达6个月。建议将液氮贮存在摄氏零下120度(通常可达摄氏零下196度)或其配对造血干细胞数年。
获得脐带血干细胞后,将其收集在无菌容器中以制备干细胞储备溶液。在制备过程中,从血液中去除压载元素——红细胞、成熟白细胞和多余的血浆。同时,进行了生化研究以确定移植过程中细胞相容性的特征。此外,检查血液是否感染了细菌或病毒。现代低温技术可以让你保持细胞处于低温状态,时间几乎是无限的。研究表明,超过95%的细胞在-196摄氏度的液氮中保存15年后仍然有效。
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